华洋科仪
圆二色光谱仪是使用最为广泛的测定蛋白质二级结构的办法,是研讨稀溶液中蛋白质构象的一种快速、简略、较精确的办法。它可以在溶液状况下测定,较接近其生理状况。而且测定办法快速简洁,对构象改变灵敏,所以它是现在研讨蛋白质二级结构的首要手法之一,并已广泛使用于蛋白质的构象研讨中。
用于揣度非对称分子的构型和构象的一种旋光光谱。光学活性物质对组成平面偏振光的左旋和右旋圆偏振光的吸收系数(ε)是不相等的,εL≠εR,即具有圆二色性。假如以不同波长的平面偏振光的波长λ为横坐标,以吸收系数之差Δε=εL-εR为纵坐标作图,得到的图谱即是圆二色光谱,简称CD。
假如某手性化合物在紫外可见区域有吸收,就可以得到具有特征的圆二色光谱。因为εL≠εR,透射光不再是平面偏振光,而是椭圆偏振光,摩尔椭圆度[θ]与Δε的关系为:[θ]=3300Δε。圆二色谱也可以摩尔椭圆度为纵坐标,以波长为横坐标作图。因为△ε有正值和负值之分,所以圆二色谱也有呈峰的正性圆二色谱和呈谷的负性圆二色谱。在紫外可见光区域测定圆二色谱与旋光谱,其意图是揣度有机化合物的构型和构象。
样品要求
1. 样品有必要坚持一定的纯度不含光吸收的杂质,溶剂有必要在测定波长没有吸收搅扰;样品能彻底溶解在溶剂中, 构成均一通明的溶液。
2. 氮气流量的操控
3. 缓冲液、溶剂要求与池子挑选:缓冲液和溶剂在制造溶液前要做独自的检查,看是否在测定波长规模内有吸收搅扰,看是否构成沉淀和胶状;在蛋白质测量中,经常挑选通明性极好的磷酸盐作为缓冲体系。
4. 样品浓度与池子挑选
样品不同,测定的圆二色光谱规模不同,对池子巨细(光径)的挑选和浓度的要求也不一样。蛋白质CD光谱测量一般在相对较稀的溶液中进行。
原理
圆二色光谱选用特性少高効率的28度入射角干涉仪、集光効率高的光学系、扫除双折射元件的反射光学系,高精度操控光轴,经过操控伪影和经时改变使装置始终坚持佳状况。圆二色光谱由合适VCD的演算法的DSP确定检测功用、完成了信噪比的大幅度改进,经过使用只透过VCD光谱测量目标吸收带的窄带滤光片,可以测得现有办法测不到的微小波峰。
根据圆二色光谱法的原理和测试要求规划制成的仪器称为圆二色光谱仪。现在圆二色光谱法及其仪器已广泛使用于有机化学、生物化学、配位化学和药物化学等领域,成为研讨有机化合物的立体构型的一个重要办法。
使用圆二色光谱相关仪器时需要留意以下几点要求
1. 仪器发生毛病时应及时报告技术人员处理.仪器发生异常现象时,马上封闭电源,维护现场并及时上报。
2. 不乱按键盘,操作人员不得进入操作规程规则以外的任何程序,不得按规则以外的任何功用键.卸下火花台板时要轻拿轻放,避免内表面划伤.取出火花室内圆石英垫片和玻璃套管时必须谨慎小心,避免操作不当致其破碎。
3. 压样品夹子要笔直,不得在未夹好样品时按激起键,不得在激起时接触或抬起样品夹.假如遇到激起时声响很大,应该按F3键中止,不允许直接抬起样品夹,否则易造成电路板烧毁。
4. 激起样品后在火花台内发生黑色沉积物可导致电极与火花台之间短路,所以火花台应定期整理。
5. 非岗位人员不得随意进入机房,机房内禁止吸烟,吃食物。
6. 假如遇到突然断电时,应先关总,再将其它电源封闭,等到来电后,按规程条款进行开机操作。
圆二色光谱的特色
1. 双光源规划带来无可比拟的信噪比,技术可晋级,可使在测量固体样品时消除固体样品自身的误差,同时采集红外光谱和振荡圆二色光谱。圆二色光谱数字信号处理,而无需确定或者电子滤波,独立的红外光源接口、PEM的恒温对应可以获得没有经时改变的基线。
2. 选用特性少高効率的28度入射角干涉仪、集光効率高的光学系、扫除双折射元件的反射光学系,高精度操控光轴,经过操控伪影和经时改变使装置始终坚持zui佳状况。圆二色光谱由合适VCD的演算法的DSP确定检测功用、完成了信噪比的大幅度改进,经过使用只透过VCD光谱测量目标吸收带的窄带滤光片,可以测得现有办法测不到的微小波峰。
3. 光学系、样品室、检测器都可以进行吹扫、可不受大气的影响安稳测量,一机多功用,可检测紫外吸收光谱,圆二色光谱,总荧光谱,光散色谱, 线二色谱及荧光各相异性谱。圆二色光谱首要用于手性光学活性物质的研讨。可用于有机立体化学研讨、光学活性物质纯度测试、药物定量分析、天然有机化学、生物化学与宏观大分子、金属络合物化学、聚合物化学、蛋白质折叠研讨、蛋白质构象研讨、物理化学等。
4. 横电磁波,是一种在各个方向上振荡的射线。其电场矢量E 与磁场矢量H 相互笔直,且与光波传达方向笔直。因为发生感光作用的首要是电场矢量,一般就将电场矢量作为光波的振荡矢量。光波电场矢量与传达方向所组成的平面称为光波的振荡面。若此振荡面不随时刻改变,这束光就称为平面偏振光,其振荡面即称为偏振面。
5. 平面偏振光可分解为振幅、频率相同,旋转方向相反的两圆偏振光。其间电矢量以顺时针方向旋转的称为右旋圆偏振光,其间以逆时针方向旋转的称为左旋圆偏振光。两束振幅、频率相同,旋转方向相反的偏振光也可以合成为1束平面偏振光。假如两束偏振光的振幅(强度) 不相同,则合成的将是1束椭圆偏振光。