圆二色光谱仪的原理
圆二色光谱仪的原理基于圆二色性(Circular Dichroism, CD),这是一种光学现象,当平面偏振光通过具有旋光活性的介质时,由于介质中同一种旋光活性分子存在手性不同的两种构型(如左旋和右旋),它们对平面偏振光所分解成的右旋和左旋圆偏振光的吸收不同,从而产生圆二色性。具体来说,当分子与圆偏振光相互作用时,吸收光的旋转方向和强度会发生改变,这种差异就形成了圆二色光谱。这种原理使得圆二色光谱仪能够分析物质的旋光性,进而研究物质的构象和结构。
圆二色光谱仪的使用注意事项
样品准备:
确保样品的纯度和浓度。样品的纯度对于获得高质量的圆二色谱图至关重要,避免杂质对谱图的干扰。同时,合适的样品浓度也是获得良好信噪比的关键因素。
选择合适的溶剂来溶解样品,并保持其稳定性。
仪器设置:
设置好合适的光强、光路和温度条件。这些条件对于获得准确的谱图至关重要。
在标准操作时,谱带宽度通常选为1 nm。对于高分辨率测量,可能需要使用较窄的狭缝宽度,但此时要注意光电倍增管的电压较高,谱的信噪比可能会变差。
操作规范:
不乱按键盘,操作人员应严格遵守操作规程,不得进入规定以外的任何程序或按规定以外的任何功能键。
在处理样品和仪器部件(如火花台板、圆石英垫片和玻璃套管)时要轻拿轻放,避免划伤或破碎。
压样品夹子时要垂直,确保样品夹紧后再按激发键,避免在激发时触摸或抬起样品夹。如果遇到激发时声音很大,应该按停止键,不允许直接抬起样品夹,以防电路板烧毁。
仪器维护:
仪器发生故障时应及时报告技术人员处理。仪器发生异常现象时,应马上关闭电源,保护现场并及时上报。
火花台应定期清理,以防激发样品后产生的黑色沉积物导致电极与火花台之间短路。
非岗位人员不得随意进入机房,机房内禁止吸烟、吃食物等可能污染或损坏仪器的行为。
数据处理:
椭圆率和摩尔椭圆率都依赖于测量条件,因此温度、波长和样品浓度等测量条件应特别注明。
在分析圆二色光谱图时,应注意识别可能的假象,如荧光或杂散光引起的干扰。
安全注意事项:
在操作过程中应注意个人安全,避免触电、烫伤等意外事故的发生。
遵守实验室的安全规定和操作规程,确保实验环境的整洁和安全。
通过以上注意事项的遵守和实施,可以确保圆二色光谱仪的正常运行和实验结果的准确性。